हाइब्रिडोमा सेल विस्तार और सबक्लोनिंग माध्यम का विवरण

产品信息 उत्पाद विवरण

产品名称

प्रोडक्ट का नाम

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

हाइब्रिडोमा सेल विस्तार और सबक्लोनिंग माध्यम

货号 Cat.No

बीआरएस-MED02

规格

विनिर्देश

500ml/瓶

500 एमएल/बोतल

产品组分

अवयव

डीएमईएम मूल्य निर्धारण: 80%(体积比)

डीएमईएम बेस मीडियम: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

भ्रूण बोवाइन सीरम (FBS, आयातित): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

वातानुकूलित माध्यम: 10% (v/v)

खुराक:100 प्रति/एमएल

पेनिसिलिन: 100 यू/एमएल

खुराक:100 प्रति/एमएल

स्ट्रेप्टोमाइसिन: 100 यू/एमएल

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

अन्य योजक: एकल - कोशिका प्रसार कारक और छोटे अणु पूरक

保存条件

जमा करने की अवस्था

-20 डिग्री सेल्सियस, तापमान 18 डिग्री सेल्सियस.

-20 डिग्री पर स्टोर करें, शेल्फ लाइफ 18 महीने

使用方法

उपयोग के लिए निर्देश

培养基融化:

37 डिग्री डिग्री तापमान सीमा, 37 डिग्री डिग्री सेल्सियस डिग्री;

समय: 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置3-5min使其

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

माध्यम को पिघलाना:

माध्यम को 37 डिग्री पानी के स्नान में पिघलाएं। बाहरी सतह को 70% इथेनॉल से पोंछें और उपयोग के लिए जैव सुरक्षा कैबिनेट में रखें।
नोट: पिघलने के बाद थोड़ी मात्रा में सफेद फ्लोक्यूलेंट सामग्री का दिखना सामान्य है। फ़्लॉक्स को व्यवस्थित होने के लिए माध्यम को 3-5 मिनट तक खड़े रहने दें, फिर उपयोग के लिए सतह पर तैरनेवाला इकट्ठा करें।

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等) मोबाइल फोन की बैटरी 0.8-1.5 सेल/सेल/200ul बैटरी चार्ज करती है।

फ्यूजन वेल्स को संभालना - स्वस्थ कोशिकाएं:

अच्छी स्थिति में कोशिकाओं वाले संलयन कुओं के लिए (उदाहरण के लिए, मध्यम रंग सामान्य या थोड़ा पीला, माइक्रोस्कोप के तहत कोशिकाएं स्वस्थ, उज्ज्वल और सामान्य आकार में दिखाई देती हैं), पीले पिपेट टिप के साथ धीरे से ऊपर और नीचे पिपेट करें। 200 µL माध्यम में कोशिकाओं और प्लेट को 0.8-1.5 कोशिकाओं/वेल पर गिनें।

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

फ़्यूज़न वेल्स को संभालना - उप-इष्टतम कोशिकाएँ:

उप-इष्टतम स्थिति में कोशिकाओं वाले संलयन कुओं के लिए (उदाहरण के लिए, मध्यम अम्लीकृत/पीली या कोशिकाएं सिकुड़ी हुई, माइक्रोस्कोप के नीचे गहरे रंग की दिखाई देती हैं), बाद के सबक्लोनिंग के लिए दो विकल्प उपलब्ध हैं:

24 दिनों के लिए 1 मिलीलीटर तरल पदार्थ का उपयोग करें板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1.5सेल/सेल/200ul सेल), बैटरी सेल细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

विकल्प 1: संलयन कूप से कोशिकाओं को इस माध्यम के 1 एमएल युक्त 24-अच्छी प्लेट में स्थानांतरित करें। विस्तार के 2-3 दिनों के बाद, कोशिकाओं की गिनती करें और 200 µL माध्यम में 0.8-1.5 कोशिकाओं/वेल पर सबक्लोनिंग करें। इस स्तर पर, कोशिका दोहरीकरण सीमित है लेकिन कोशिका की स्थिति अच्छी है, जो इसे सबक्लोनिंग के लिए आदर्श बनाती है।

第2 方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清, 每孔补充200ul 新鲜的本培养基, 至37度5% CO2 सेल सेल 3-4 सेल, 0.8-1.5 सेल/सेल/200ul सेल फोन;

पीले पिपेट टिप का उपयोग करके फ्यूजन वेल से सतह पर तैरनेवाला को सावधानीपूर्वक हटा दें और प्रति वेल में 200 μL ताजा माध्यम डालें। 3-4 घंटे के लिए 37 डिग्री, 5% CO₂ पर इनक्यूबेट करें। फिर, कोशिकाओं का नमूना लें, गिनें, और 200 µL माध्यम में 0.8-1.5 कोशिकाओं/वेल पर सबक्लोनिंग करें।

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

ध्यान दें: हाइब्रिडोमा सेल एक्सपेंशन और सबक्लोनिंग मीडियम के साथ सुसंस्कृत सबक्लोन आमतौर पर सबक्लोनिंग के बाद 6-8 दिनों में डाउनस्ट्रीम स्क्रीनिंग या विश्लेषण के लिए उपयुक्त चरण तक पहुंच जाते हैं।